一般演題

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神経膠腫のp53遺伝子変異の検索におけるCFLP法の有用性：上原久生¹,河野寛一²,片岡寛章³,鮫島哲朗¹,森山拓造¹,脇坂信一郎¹（¹宮崎医大・脳外,²都城市郡医師会病院・脳外,³宮崎医大・第2病理）

Usefulness of CFLP for Detection of p53 Mutation in Human Glioma : Hisao UEHARA¹, Hirokazu KAWANO², Hiroaki KATAOKA³, Teturo SAMESHIMA¹, Takuzou MORIYAMA³, Shinichiro WAKISAKA¹ (¹Dept. of Neurosurg., Miyazaki Med. Col., ²Dept. of Neurosurg., Miyakonojyou Med. Association Hosp.,³2nd. Dept. of Pathol., Miyazaki Med. Col.)

【目的】新しく開発されたCFLP (CLEAVASE Fragment Length Polymorphism) 法を使用した神経膠腫のp53遺伝子の変異の検索結果とsequencingで決定した塩基配列とを比較し、その有用性を検討する。
【対象】1994年9月から1997年8月までに神経膠腫と診断された30症例、35 sample。組織分類、low grade astrocytoma : 3, oligodendroglioma : 1, anaplastic astrocytoma : 4, glioblastoma multiforme : 21, 正常controlのてんかん切除脳 : 1。
【方法】組織から抽出したgenomic DNAのp53のexon 5-8に対応する部分をPCRにて増幅する。それにヘアピン構造の5ユ側を特異的に切断するCLEAVASE^Rを加え、その反応物を電気泳動し判定する。変異が存在すると切断部位が変わり、異なるパターンで泳動される。その結果とsequencingで決定した実際の塩基配列とを比較検討する。
【結果】神経膠腫のp53遺伝子変異はCFLP法にて高い検出率を示し、sequenceの結果とも高い相関性を示した。CFLP法は遺伝子の変異の検索に非常に有用と推察された。