ポスターセッション

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N2-ethyl-dGTPの大腸菌および哺乳類DNAポリメラーゼによるDNAへの取り込み：松田知成^１、寺島勇^２、松井三郎^１、澁谷眞也^２（^１京大・環境質セ、^２ニューヨーク州立大ストーニーブルック校・医・薬学）

Incorporation of N2-ethyl-dGTP by bacteria and mammalian DNA polymerases : Tomonari MATSUDA¹, Isamu TERASHIMA², Saburo MATSUI¹, Shinya SHIBUTANI² (¹RCEQC, Kyoto Univ., ²Dept. of Pharm. Sci., SUNY at Stony Brook）

N²-ethyl(Et)-dGはアセトアルデヒドによって生成され、アルコール中毒患者の白血球などで検出されている。N2-Et-dGTPのDNAへの取り込みを、大腸菌DNAポリメラーゼIのクレノーフラグメント、及び牛胸腺DNAポリメラーゼα、β、δを用いて調べた。³²Pラベルしたプライマーをアニールしたオリゴヌクレオチドを用いて、C,A,G,Tに対するN2-Et-dGTPの取り込みを調べた実験では、すべてのポリメラーゼでCの反対側にN²-Et-dGTPがよく取り込まれた。クレノーフラグメントではT,G,Aの反対側にもN²-Et-dGTPを取り込んだ。また、polαではGとAの反対側に、polβではTの反対側にもN²-Et-dGTPを取り込んだ。一方、polδではCの反対側以外には取り込まれなかった。これらポリメラーゼによるN2-Et-dGTPの取り込みの反応速度を測定したところ、Cに対する取り込みでは、8-oxo-dGTPに比べてpolαで300倍、polβで約７倍効率よく取り込まれることがわかった。さらに、N²-Et-dGを3'末端に持つプライマーを用いたDNAの伸長実験を行ったところ、容易に伸長することが明らかとなった。以上、N²-Et-dGTPはDNA合成の過程で非常によく取り込まれ、かつ、そのまま合成が進むので完全にDNAに組み込まれることが明らかとなった。