ABSTRACT 1179(P4-8)
ラット初代培養肝細胞の増殖と分化におけるPoly ( ADP-ribose) polymerase inhibitor の役割:佐藤文彦1.2、三高俊広1、桧垣長斗1.2、平田公一2、望月洋一1 (1札幌医大がん研病理、2札幌医大第一外科)
Effect of poly( ADP-ribose) polymerase inhibitors on the proliferation and differentiation of primary cultured rat hepatocytes: Fumihiko SATO1.2, Toshihiro MITAKA1, Nagato HIGAKI1.2, Kohichi HIRATA2, Yohichi MOCHIZUKI1 (1Dept. of Pathol., Cancer Res. Inst. 21st Dep. of Surg., Sapporo Med.Univ. Sch. of Med.)
[目的]我々は、ラット初代培養肝細胞の増殖及び分化機能の長期維持の目的でNicotinamideを用いてきた。しかしながら、Nicotinamideの作用機序は未だに充分解明されてはいない。今回、Nicotinamideの有するビタミン、及びpoly ( ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitor という2つの作用のいずれが肝細胞の増殖・分化に影響を及ぼすかを検討した。[方法]DMEMに10-7M Dexamethasone, 0.5mg/ml Insulin, 10ng/ml EGF等を加えた培養液中にNicotinamide, Nicotinic acid, 3 aminobenzamide (3AB), 3 acetylpyridine(3AP)をそれぞれ加えた。増殖能をBrdU染色で、Albumin,TO,Cx32のmRNAの発現をNorthern Blot法を用いて検討した。[結果]3日目以後、 3APでは胞体の大きな楕円形の細胞が敷石状に並んだ。3~4日目の増殖能を BrdU Labelingで調べるとControlでは約50%の細胞でラベルされているのに対して、10mM Nicotinamide, 5mM 3ABではそれぞれ約70%と促進され、10mM Nicotinic acid, 10mM 3APではそれぞれ27%,18%と抑制を示した。Albumin, TO,Cx32のmRNAの発現はNicotinamide, Nicotinic acid, 3APでは高く維持され、3ABでは徐々に減少を示した。