ポスターセッション

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RasによるRalの活性化機構とRalGDSの細胞内局在変化の役割：松原賢治¹,岸田昭世¹,松浦善治²,北山仁志³,野田亮³,菊池章¹（¹広島大・医・生化,²国立感染研,³京大・医・分子腫瘍）

Activation of Ral through Ras-dependent translocation of RalGDS : Kenji MATSUBARA¹,Shosei KISHIDA¹,Yoshiharu MATUURA²,Hitoshi KITAYAMA³,Makoto NODA³,Akira KIKUCHI¹ (¹Dept. of Biochemistry, Hiroshima Univ. Sch. of Med., ²Dept. of Virology, National Institute of Infectious diseases, ³Dept. of Molecular Oncology, Kyoto Univ. Grad. Sch. of Med.）

Rasからのシグナルの一部はRalGDSを介してRalに伝達されることが明らかになりつつある。しかし、Ras familyに属するRap1はRalGDSと結合するが、細胞内でRalGDSを活性化しない。そこでRasとRap1のキメラを作成し、これらの蛋白質の細胞内局在とRalGDSの活性化との関連を解析した。COS細胞内でRas及びRap1のN末端とRasのC末端のキメラ(Rap1/Rasキメラ)はRalGDSを活性化したが、Rap1及びRasのN末端とRap1のC末端のキメラ(Ras/Rap1キメラ)はRalGDSを活性化しなかった。NIH3T3細胞にこれらの蛋白質を発現させて免疫染色を行なったところ、RasやRap1/Rasキメラ、Ralは細胞膜に、Rap1とRas/Rap1キメラは核周囲領域に存在した。RalGDSは細胞質に存在したが、RasまたはRap1と共に発現させるとRalGDSもそれぞれ細胞膜と核周囲領域へと局在が変化した。さらに、Ｃ末端に細胞膜移行シグナルを付加したRalGDS(RalGDS-CAAX)はCOS細胞内で単独でRalを活性化した。リポソームを用いたRas-RalGDS-Ralシグナル伝達の再構成実験系では、RalGDSはRasに依存してRalに対するGDS活性を示したが、RalGDS-CAAXはRas非存在下においてもRalに対するGDS活性を示した。以上の結果より、RasによるRalGDSの細胞質から細胞膜への細胞内局在の変化によってRalの活性化が起こることが明らかになった。