ポスターセッション

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ラット肝発癌過程における受容体型チロシンキナーゼ発現の特異性と局在の検討：黒田宏昭¹, 大津留晶², 二口充³, 難波裕幸², 白井智之³, 兼松隆之¹（¹長崎大・医・二外, ²長崎大・原研・分子医療, ³名市大・医・一病理）

Expression of receptor-type tyrosine kinase gene family during rat hepatocarcinogenesis: Hiroaki KURODA¹, Akira OHTSURU², Mitsuru FUTAKUCHI³, Hiroyuki NAMBA², Tomoyuki SHIRAI³, Takashi KANEMATSU¹ (¹Dept. of Surg. II, ²Dept. of Nature Med., Nagasaki Univ. Med. Sch., ³1st Dept. Pathol., Nagoya City Univ. Med. Sch.)

【目的】受容体型チロシンキナーゼ(RTK)遺伝子の発現様式は癌化の過程で変化していくと考えられる。多数のRTKがクローニングされたが、肝発癌において特異性のあるRTKの検討はない。そこで、ラット化学肝発癌モデルを用い、GST-Pを前癌病変のマーカーとし、肝癌と前癌病変、正常肝における多様なRTK遺伝子の分布の差を調べ、その発現量、局在を検討した。【対象・方法】F344ラットにDEN経口投与で作製した肝癌の癌部と正常肝よりRNAを抽出した。RTK遺伝子のキナーゼドメインよりdegenerated primerを作製、RT-PCRを行いサブクローニングした。計459クローンのシークエンスを行い、ジーンバンクよりホモロジー検索を行った。得られたRTKの発現を、RT-PCR、ノーザンブロッティングで検討した。更にGST-P染色にて前癌病変を同定し、受容体の局在を発癌過程の各ステージで免疫染色、in situ hybridization (ISH)にて比較した。【結果】ホモロジー検索にて正常肝及び肝癌より23種類のRTK遺伝子の発現を認めた。そのうちc-Met (HGF受容体)と血管内皮特異的受容体と考えられているTie-2、Flk-1(VEGF受容体)などが肝癌において優位であった。免疫染色、ISHにて、Flk-1、c-Metは前癌病変より発現が増加していた。またTie-2は肝細胞の幹細胞である可能性が議論されているoval cellに強く発現していた。【結語】肝癌発生の早期から特異的なRTK遺伝子発現変化が証明され、多段階発癌において増殖因子のオートクライン、パラクライン機構の重要性が示唆された。