ポスターセッション

一覧　トップ

酵母を用いたラットp53遺伝子の優性変異検出法の確立：中田大地^1,4, 外木秀文¹, 丸谷真守美¹, 巴一¹, 常松泉¹, 浜田淳一¹, 柏崎晴彦^1,3, 青山哲也¹, 小林正伸², 細川眞澄男², 守内哲也¹ (北大・医・¹癌研細胞制御, ²病理, ³歯・^２口外, ⁴北海道医療大・歯・２口外)

Establishment of yeast functional assay for dominant mutation of rat p53: Daichi NAKATA^1,4, Hidefumi TONOKI¹, Masumi MARUTANI¹, Yi BA¹, Izumi TSUNEMATSU¹, Jun-ichi HAMADA¹, Haruhiko KASHIWAZAKI^1,3, Tetsuta AOYAMA¹, Masanobu KOBAYASHI², Masuo HOSOKAWA², Tetsuta MORIUCHI¹ (¹Div. Cell Biol. and ²Pathol., Cancer Inst., ³2nd Dept., Oral Surgery, Hokkaido Univ. Sch. Med., ⁴2nd Dept., Oral Surgery, Health Sci. Univ. Hokkaido)

【目的】我々はラットp53の酵母アッセイ法を確立したが、今回我々はさらにp53の機能的変異がloss of functionかdominant negativeかを区別するための酵母アッセイ法の開発を行った。
【方法】選択マーカーを異にする2種類のベクターを用いて、野生型と変異型のp53遺伝子をレポーター用酵母内で同時に発現させる系を構築した。
【結果】まず従来の酵母アッセイでラット培養細胞24株をスクリーニングして、p53が野生型と変異型のヘテロ接合体となっている株を選別した。これらの細胞におけるp53変異はdominant negativeの機能をもつと予測して新しい酵母アッセイ法の実験群として用い、LOH/変異型のヘミ接合体で同定されたp53変異をnegative controlとして用いた。
【考察】 dominant negative変異を検出するp53酵母アッセイ法の確立はp53の機能的変異をさらに詳しく解析する手段として有用と考えられる。