ポスターセッション

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Chromosome Transferを用いたDNA mismatch repair機能正常化細胞におけるhMSH2蛋白・hMLH1蛋白及びPCNAの核内局在：野崎　晃一¹、渡部　洋¹、中嶋　博之¹、星合　昊¹、逸見　仁道²、児井　稔³、野田　起一郎¹（¹近畿大・産婦、²東邦大・分子生物、³米国国立環境衛生研）

Correction of G2 cell cycle check point by micro-cell mediated chromosome transfer in DNA mismatch repair deficient cell：Kohichi NOZAKI¹, Yoh WATANABE¹, Hiroyuki NAKAJIMA¹, Hiroshi HOSHIAI¹, Hiromichi HEMMI², Minoru KOI³, Kiichirou NODA¹ (¹Dept. Obst. and Gyn. Kinki Univ. School of Med., ²Dept. Mol. Biol. Toho Univ. ³National Institutes of Environmental Health Sciences. U.S.A. )

（目的）DNA mismatch repair ( MMR )機構におけるhMSH2蛋白・hMLH1蛋白の細胞核内発現とMMR機構におけるPCNAの関与についてMMR deficient cellとmicro-cell mediated chromosome transferを用いたMMR proficient cellとの比較から詳細に検討した。
（方法）MMR機構の主要遺伝子であるhMLH1遺伝子のmutationが確認された細胞にmicro-cell mediated chromosome transferによりchromosome 3を導入し、MNNGによって誘発したDNA傷害に対するhMSH2蛋白、hMLH1蛋白及びPCNAの細胞核内発現について、抗hMSH2抗体、抗hMSH2抗体、抗PCNA抗体を用いた蛍光染色を行い、これらの細胞核内発現についてconfocal laser scaning microscope ( CLSM )を用いた細胞核断層像の観察から検討を行った。
（結果）chromosome 2 transferによるMMR proficient cellでは、MNNG接触後４８時間から細胞のG2 phaseへの集積が認められ、同一検体の核断層像においてはhMSH2蛋白、hMLH1蛋白の著明な発現が観察された。またPCNAの核断層像におけるfluorescence intensityの核内局在は、hMSH2蛋白及びhMLH1蛋白の核内局在と一致した。
（考察）ヒトMMR機構においては、hMSH2及びhMLH1遺伝子の機能の正常化が必須であり、さらにヒトMMR機序にはPCNAが密接に関与する事実がCLSMを用いた核断層像の観察から明らかとなった。