一般演題

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Ｂ型肝炎ウイルスＸ遺伝子によるヒトＥＦ−１αｍＲＮＡレベルの転写後調節に関与する細胞因子：嶋津　務, 小池　克郎 (癌研 ・ 研 ・ 遺伝子）

Cellular factor involved in the post-transcriptional regulation of the level of human EF-1α mRNA by hepatitis B virus X gene : Tsutomu SHIMAZU, Katsuto KOIKE (Dept. of Gene Res., The Cancer Inst., JFCR)

Ｂ型肝炎ウイルスＸ遺伝子は、多くのウイルスや細胞の遺伝子の転写を活性化し、Ｂ型肝炎のみならず肝癌の発症に関係していることが知られている。昨年の総会で私達は、Ｘ遺伝子がヒトＥＦ−１α(human elongation factor 1α) 遺伝子のプロモーター(TATA box)下流の５’非翻訳領域に存在する２２塩基を介してｍＲＮＡのレベルを転写後に調節する新規な機能を有することを報告した。そこで私達は、Ｘ遺伝子によるｍＲＮＡレベルの転写後調節のメカニズムを明らかにするべく、Ｘ蛋白質応答領域ＤＮＡを鋳型としてin vitro transcription で合成したＲＮＡプローブと、HepG2およびHuh7細胞から調製した細胞質抽出液を用い、gel shift assay によりＥＦ−１αｍＲＮＡの５’非翻訳領域中の２２塩基に結合する細胞因子の解析を試みた。その結果、ＲＮＡ−蛋白質複合体に由来するバンドが検出され、このバンドは２２塩基を含まないプローブを用いたときには出現しないことがわかった。さらに変異プローブを用いた競合実験の結果、この因子は２２塩基で形成される２次構造を認識して結合する可能性が示唆された。現在、Ｘ蛋白質が恒常的に発現する細胞株を樹立し、Ｘ蛋白質の発現に伴うこの因子の質的、量的変化や、endogenous EF-1αｍＲＮＡレベルについて検討中である。