一般演題

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NOによるVEGF遺伝子転写活性化機構の解析：木村秀生¹,倉島由紀子¹,小倉勤¹,陳勁松¹,橋本耕一¹,幕内雅敏²,江角浩安¹（¹国立がんセ・研・支所・がん治,²東大・医・二外）

Characterization of mechanism of VEGF gene transcriptional activation by NO: Hideo KIMURA¹, Yukiko KURASHIMA¹, Tsutomu OGURA¹, Keishu CHIN¹, Koichi HASHIMOTO¹, Masatoshi MAKUUCHI², Hiroyasu ESUMI¹ (¹Inv. Treat. Div., Natl. Cancer Ctr. Res. Inst. East, ²Second Dept. of Surgery, Univ. of Tokyo)

（目的）我々はNitric Oxide (NO)が血管内皮増殖因子(VEGF)遺伝子を発現誘導することを明らかにした。今回はその転写制御に関わるcis-elementを明らかにすることを目的とした。
（方法）ヒトVEGF遺伝子promoter およびそのdeletion mutantをluciferase遺伝子をもつreporter plasmidに組み込んだ。これをA-172 human glioblastoma細胞に導入し、NOを発生するS-nitroso-N-acetyl-D,L-penicillamine (SNAP)での誘導性を調べた。対照として低酸素（1%酸素）での培養を行った。さらに、hypoxia responsive element (HRE)を中心とした60-300 bpをHSV-TK promoterとluciferase遺伝子を含むplasmidに組込み、同様に転写活性を調べた。
（結果）VEGF遺伝子promoter領域のうちHREを含む約220 bpの欠損ではNOによる転写誘導能は持たなかった。HREまたはこれに隣接する領域 (ancillary sequence)のいずれかに変異があるものもNOによる活性化が消失した。低酸素の場合も同様の結果が得られた。SNAP処理の際にguanylate cyclase阻害剤を投与するとNOによる転写活性化は著明に低下したが、低酸素による活性化に変化はなかった。これらはNOによるHIF-1の活性化とよく一致した。
（考察）低酸素とNOによるVEGF遺伝子制御のcis-elementは共通であったが、NOによる転写誘導はcGMP依存性であり、低酸素とは異なるシグナル伝達により活性化されることが明らかになった。