一般演題

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新規Zinc Finger 蛋白質CIZのCASTing解析：中元哲也¹、山形哲也¹、本田浩章¹、上野博夫¹、矢崎義雄¹、平井久丸²（¹東大・医・三内、²東大・医・無菌）

CASTing analysis of a novel zinc finger protein, CIZ : Tetsuya NAKAMOTO¹, Tetsuya YAMAGATA¹, Hiroaki HONDA¹, Hiroo UENO¹, Yoshio YAZAKI¹, Hisamaru HIRAI² (¹3rd Dept. of Intern. Med, Univ. of Tokyo, ²Dept. of Cell Therapy and Stem Cell Medicine, Univ. of Tokyo)

昨年の癌学会で我々は、細胞接着関連蛋白質p130^CasのSH3領域に結合する蛋白質として、新規Zinc Finger 蛋白質CIZ (Cas interacting Zinc Finger Protein) のクローニングを報告した。CIZは、細胞内でCasと結合し、接着斑と核に局在する。そのことから、CIZは接着斑で生じたシグナルを核に伝えており、そのZinc Finger 部分でDNAと結合し、転写因子として働いていることが考えられた。
そこで、我々は、CIZのDNA結合コンセンサスをCASTing 法で決定することによって、CIZがどのような遺伝子の制御をしうるかを予想しようとした。FLAG-tagをつけたCIZとランダムオリゴマーを混合し、anti-FLAGで免疫沈降したものをPCRで増幅することを５回繰り返したあと得られたオリゴマーのDNA配列を調べた。このオリゴマーのほとんどはAAAAAという配列を含んでおり、これがCIZの結合コンセンサスであると考えられる。このような配列はコラゲナーゼなどMatrix Metalloproteinases (MMP)のプロモータ領域にしばしば認められる。コラゲナーゼのプロモータ領域に由来するAAAAAを含む配列はゲルシフト法でCIZと結合し、anti-CIZ抗体でスーパーシフトが認められた。このことから、CIZはコラゲナーゼなどMMPの制御を行っている可能性が示唆された。