一般演題

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ヒトalpha1-6Fucosyltransferase の遺伝子解析：山口幸洋,魚住尚史,池田義孝,藤井順逸,谷口直之（阪大・医・生化）

The genomic structure of the human α1-6fucosyl-transferase gene : Yukihiro YAMAGUCHI, Naofumi UOZUMI, Yoshitaka IKEDA, Junichi FUJII, Naoyuki TANIGUCHI (Dept. of Biochem., Osaka Univ., Med. Sch.)

α1-6Fucosyltransferase (alpha1-6FucT) はアスパラギン結合型糖鎖の還元末端のGlcNAc，いわゆるinnermost GlcNAc にフコースを転移する酵素である．α1-6フコースは肝癌患者の産生するalphaphetoprotein (AFP) で増加していることが知られている．我々はヒトとブタより本酵素の精製とクローニングを行い，報告している．今回ヒトα1-6FucT のゲノムの構造解析を行った．ヒトα1-6FucT のcDNA をプローブに用いてヒトゲノムのファージライブラリーよりプラークハイブリダイゼーションによって本遺伝子をコードするDNA断片を複数クローニングし，各々の制限酵素マップを作製すると共に，cDNAとハイブリダイズするDNA断片の塩基配列を決定してエキソンとイントロンの境界を決めた．そして，クローン間でイントロンのオーバーラップがなかった箇所についてはヒトのゲノムDNAをサンプルにLA-PCR並びにFIGE法によるパルスフィールド電気泳動を併用したサザンハイブリダイゼーションによりその距離を決定した．さらに，5'RACEを行い，転写開始点を検討した．その結果，本酵素をコードする遺伝子は全長が 50 kbp 以上に及び，その翻訳領域は既知の多くのFucosyltransferase と異なり，複数（８個）のエクソンに分断されていることが判った．また，5'非翻訳領域も複数のエキソンに分かれていた．