一般演題

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リンパ節ＨＥＶのＬ−セレクチンリガンド、６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘおよびＭＥＣＡ−７９抗原は共通の硫酸基転移酵素で合成される： 木村尚子^１,光岡ちか子^１,平岩 望^１,金森審子^１,玉谷卓也^２,内村健治^３,村松 喬^３,神奈木玲児^１(^１愛知がんセ・２病,^２JＴ・探索研,^３名大医・第一生化）

A common 6-sulfotransferase is involved in the synthesis of 6-sulfo sialyl Lewis X and MECA-79 determinants, the putative L-selectin ligands on HEV endothelial cells. Naoko KIMURA^１, Chikako MITSUOKA^１, Nozomu HIRAIWA^１, Takuya TAMATANI^２, Kenji UCHIMURA^３, Takashi MURAMATSU^３, Reiji KANNAGI^１(^１Exp. Pathol., Aichi Cancer Ctr., ^２JT, Res. Lab., ^３1st. Dept. Biochem., Nagoya Univ.)

リンパ球のリンパ節へのホーミングは、リンパ球のL-セレクチンと、HEVに発現するリガンド糖鎖を介した接着によって開始される。この細胞接着は、リンパ系悪性細胞のリンパ節浸潤の機序としても重要である。我々は昨年、ヒトリンパ節HEVでは６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘがL-セレクチンのリガンドとして働く事を報告した。一方従来から、単クローン抗体MECA-79の認識抗原が、HEV上のL-セレクチンリガンドとされてきた。今回我々は、この両抗原の異同および合成系路を検索したので報告する。【方法】検索の対象としてヒト凍結リンパ節切片およびフコシルトランスフェラーゼVII(Fuc-TVII)および６−硫酸基転移酵素(6-Sul-T)を強制発現したヒト血管内皮細胞株ECV304を用い、免疫組織染色およびフローサイトメトリーにて６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘおよびMECA-79抗原を検索した。６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘ系統の抗原の検出にはG152・G72抗体を用いた。【結果】(1)ヒトHEVにはG152抗体で認識される６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘが検出され、これらの抗体はリコンビナントL-セレクチンのHEVへの結合を阻止した。しかし、G152抗体は、マウス、ラットHEVには反応しなかった。(2)MECA-79抗体はヒトHEVと反応し、リコンビナントL-セレクチンのHEVへの結合を阻止した。本抗体はマウス、ラットHEVとも反応した。(3)ECV304細胞は、いずれの抗原も発現せず、Fuc-TVII強制発現クローンでは通常のシアリルＬｅ^ｘのみが検出され、６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘは検出されなかった。6-Sul-T強制発現細胞では、G72抗体で６−硫酸化シアリルラクトサミンが検出され、６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘは検出されなかった。６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘは、Fuc-TVII・6-Sul-Tの二重強制発現細胞にのみ検出された。(4)MECA-79抗原は、6-Sul-T強制発現細胞およびFuc-TVII・6-Sul-Tの二重強制発現細胞とで発現された。【考察】以上から、６−硫酸化シアリルＬｅ^ｘとMECA-79抗原は共通の6-Sul-Tで合成され、MECA-79抗体の反応性には、フコースは要求されないことが判明した。