一般演題

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ガングリオシドGM3による細胞増殖の制御機構-糖鎖リモデリングによる解析-：福本敏^1,2、宮崎宏¹、浦野健¹、古川圭子¹、大石秀人¹、岡島徹也¹、後藤讓治²、古川鋼一¹（¹名大、医、生化２、²長崎大、歯、小児歯）

Regulatory mechanisms of cell proliferation by ganglioside GM3 - Analysis by carbohydrate remodeling - : Satoshi FUKUMOTO^1,2, Hiroshi MIYAZAKI¹, Takeshi URANO¹, Keiko FURUKAWA¹, Hideto Oishi¹, Tetsuya OKAJIMA¹, George GOTO², Koichi FURUKAWA¹ (¹Dept. of Biochem II, Nagoya Univ. Sch. Med., ²Dept of Ped. Dent., Nagasaki Univ. Sch. Dent.)

[目的]シアル酸を有する酸性糖脂質ガングリオシドは細胞の増殖・分化の制御に重要な役割を演じていると思われるが、その機構は明らかでない。我々は、マウスcDNAライブラリーより発現クローニング法を用いてGM3合成酵素遺伝子のcDNAを単離し、GM3発現の細胞増殖に与える影響について解析を行った。[方法]マウス線維芽細胞腫の細胞株であるL cellに、マウス線維肉腫細胞CMS5j由来のcDNAライブラリーより単離したGM3合成酵素（α2,3シアル酸転移酵素）遺伝子を導入し、安定発現細胞株を作成した。これらの細胞株の細胞表面ガングリオシドの発現パターン及び細胞増殖能の変異について解析を行った。[結果と考察]発現クローニング法により、1077bpのORFを含む1710bpのcDNAを単離した。その過程に加え、シアリルモチーフの存在や基質特異性からGM3合成酵素遺伝子であることを確認した。そこで本遺伝子をL cellに導入し安定発現細胞株を作成した。フローサイトメトリーによる解析では、親株ではGM3の発現はほとんど認められないが、GM3合成酵素遺伝子導入細胞株ではGM3の高発現が認められた。また、遺伝子導入細胞の形態に著しい変異は認められなかったが、MTT法による細胞増殖能の解析では、親株に比べ2倍程度の細胞増殖能の亢進が認められた。以上のことより、GM3の発現がL cellの増殖を促進していることが示唆された。現在、GM3の細胞増殖作用のメカニズムにつき検討中である。