ポスターセッション

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BrdUで胃癌細胞MKN45に誘発される細胞死：杉原洋行¹,凌　志強¹,姚　暁虹²,服部隆則¹（¹滋賀医大・病理,²京都府立医大・病理）

Apoptotic and non-apoptotic cell death induced by BrdU in MKN-45 gastric cancer cell line: Hiroyuki SUGIHARA¹, Zhi-Qiang LING¹, Xiao-Hong YAO², Takanori HATTORI¹ (Depts. Pathol.,¹Shiga Univ. Med. Sci., ²Kyoto Pref. Univ. Med.)

BrdUは、DNA mispairだけでなく、nucleotide poolのアンバランスによってDNA strand breakをおこすことが知られているが、apoptosisを誘発する側面は最近まで明かでなかった。この2つの作用を識別するために、培養胃癌細胞株MKN45に対してBrdUの連続投与と（poolバランスを保つために）6時間ごとの間欠投与を行った。連続投与群と間欠投与群との間で、BrdU labeling indexの推移に有意な差はなく、24時間後には78-88%に達した。細胞およびapoptosisの核DNA量をDAPIによる顕微蛍光測光で定量すると、間欠投与群では、72時間後でもcell cycle arrestは起こらず、DNA量がG1 peak値よりも低いapoptosisが主としてfloating cellに増加した。連続投与では、G2 arrestが起こるとともに、DNA量がG1 peakよりも大きいS/G2 apoptosisが48時間後をピークに増加し、apoptosisのDNA量分布は、preG1とS領域に2峰性のピークを示した。このように、連続投与によるnucleotide poolのアンバランスはG2 arrestとG2 checkpointでのapoptosisを誘発するのに対し、間欠投与で見られるDNA mispairそのものの影響は、この細胞系では比較的小さいと考えられた。72時間後には細胞増殖の低下とともにapoptosisも減少したが、DNA量は正常でTUNEL陰性のhomogeneous nucleiをもつnon-viable cellが著明に増加した。これらの細胞は、96時間後には核のfragmentationが進み、apoptosisと区別できなくなったが、DNA strand breakよりもmembrane damageが先行したことより、necrosisと考えられた。