ポスターセッション

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Telomerase Reverse Transcriptase mRNAの定量による薬剤感受性試験
久富 寿¹⁾、長尾 久美¹⁾、花園 誠²⁾、荻野 満春^2,3)、引地 一昌¹⁾　(株式会社エスアールエル　遺伝子・染色体解析センター¹⁾、帝京大学市原病院 実験動物施設 ²⁾、帝京大学市原病院 婦人科 ³⁾ )

Levels of telomerase catalytic subunit mRNA in K562 and HL60 cell line under anticancer agent : Hisashi HISATOMI ¹⁾, Kumi NAGAO ¹⁾, Makoto HANAZONO ²⁾, Mitsuharu OGINO ^2,3), Kazumasa HIKIJI ¹⁾ (Center for Mol. Biol. and Cytogenet., SRL, Inc.¹⁾, Clin. Res. Center, Teikyo Univ. Sch. of Med., Ichihara Hospital. ²⁾, Dept. of Obstet. & Gynecol., Teikyo Univ. Sch. of Med., Ichihara Hospital. ³⁾)

[目的] 癌細胞に高率に高い活性が認められるテロメラーゼは内部にTelomerase RNA component (hTR)を持ち、Telomerase Reverse Transcriptase (hTRT)によってその活性化が調節されていると考えられている。我々は投薬によりテロメラーゼ活性が低下するCell LineのhTRT mRNAおよびhTR量を観察することによりテロメラーゼの活性化の機序の一端を明らかにし、hTRT mRNAの腫瘍マーカーとしての有用性を確認した。
[方法] 白血病細胞株であるK562およびHL60 cell lineを2mM Hydroxyurea存在下で24時間培養し、細胞をG1/S期に同調した後、通常培養をおこなった。マイトマイシン投与開始時を０時間とし 6, 12, 24, 36, 48時間後に細胞を回収し、テロメラーゼ活性、hTRT mRNAおよびhTRの測定に用いた。テロメラーゼ活性はTRAP-eze Telomerase Detection kit を用いたFluorescence-based TRAP法で、hTRおよびhTRT mRNAはReal-time PCR法で定量した。
[結果] マイトマイシンの投与によりK562およびHL60のテロメラーゼ活性およびhTRT mRNA量は減少傾向を示した。hTRT mRNAがテロメラーゼ活性と同様の動きを示したことからhTRT mRNAの腫瘍マーカーとしての有用性に期待がもたれた。投薬の有無にかかわらずhTR量は維持されており、テロメラーゼ活性の減少にはhTR量の関与しない場合があることが証明された。