ABSTRACT 1416(P5-7)
mico-cell mediated chromosome transferを用いたDNA mismatch repair deficient cellにおけるG2 cell cycle check pointの正常化:澤井 猛1、渡部 洋1、中嶋 博之1、星合 昊1、野田 起一郎1、児井 稔2(1近畿大・産婦、2米国国立環境衛生研)
Correction of G2 cell cycle check point by micro-cell mediated chromosome transfer in DNA mismatch repair deficient cell:Takeshi SAWAI1, Yoh WATANABE1, Hiroyuki NAKAJIMA1, Hiroshi HOSHIAI1, Kiichirou NODA1, Minoru KOI2 (1Dept. Obst. and Gyn. Kinki Univ. School of Med., 2National Institutes of Environmental Health Sciences. U.S.A. )
(目的)DNA mismatch repair system ( MMR )と細胞の傷害認識機序であるG2 cell cycle check pointとの関連性についてMMR deficient cell lineを対象としたmicro-cell mediated chromosome transferによる染色体導入から検討を行った。
(方法)hMSH2 deleted cell lineに対してmicro-cell mediated chromosome transferによりchromosome 2を細胞内に導入し、chromosome 2 transferred isolated cloneを樹立し、MNNG誘発DNA傷害に対する細胞応答について、parental cell lineとchromosome 2 isolated cloneのcell growth curveの変化を検討し、さらにBrd-U pulse labelingを行った蛍光二重染色検体から、G2 phase accumulationの有無を経時的にflow cytometryを用いて検討した。
(結果)MNNG接触後12時間、24時間、36時間、48時間、60時間、72時間に回収した細胞の検討の結果parental cell lineにおいてはcell growth curve、DNA histogram及びBrd-U labeling細胞の細胞周期の進行に明らかな変化が認められなかったのに対して、chromosome 2 transferred isolated cloneではMNNG接触後48時間から著明な細胞数の減少が認められ、DNA histogramでは明らかなS・G2M phase populationの増加とcell debrisの増加を示した。Brd-U pulse labelingを行った細胞を用いたDNA cytogramからの検討から、このS・G2・M phaseの細胞集積はG2 phase accumolationである事が明らかとなった。
(考察)MMR機構はG2 cell cycle check pointと密接に関連しており、micro-cell mediated chromosome transferを用いたMMR関連遺伝子の細胞内導入はG2 cell cycle check poointを正常化する事実が確認された。