ポスターセッション

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キメラp53発現ベクターを用いたハムスターp53変異の酵母アッセイ法の開発：柏崎晴彦^1,4、外木秀文¹、山崎　裕³、千葉逸朗³、進藤正信⁵、戸塚靖則⁴、八島秀則¹、中田大地¹、細川真澄男²、守内哲也¹（¹北大・医・癌研細胞制御、²病理、北大・歯・³１口外、⁴２口外、⁵口腔病理）

Development of yeast functional assay for hamster p53.: Haruhiko KASHIWAZAKI^1,4, Hidefumi TONOKI¹,Yutaka YAMAZAKI³, Itsuo CHIBA³ , Masanobu SHINDOH⁵ , Yasunori TOTSUKA⁴, Hidenori YASHIMA¹, Daichi NAKATA¹, Masuo HOSOKAWA², and Tetsuya MORIUCHI¹ (¹Div. Cell Biol. and ²Pathol., Cancer Inst., Hokkaido Univ. Sch. Med., ³1st. and ⁴2nd Dept. Oral Surgery, ⁵Oral Pathol., Hokkaido Univ. Sch. Dent.)

［目的］昨年、我々はラットおよびマウスのp53遺伝子変異を遺伝子相同組み換えを利用することで簡便かつ高感度に検出できる酵母アッセイ法を確立したことを本学会で報告した。今回、口腔癌の発癌モデルとして頻用されているハムスターのp53酵母アッセイの開発を行った。
［方法］ハムスターp53 cDNAを相同組み換えによりラットp53発現ベクターに組み込み、両端がラットで、DNA結合ドメインを含む大部分がハムスター由来となるキメラp53発現ベクターを作製した。これからp53のDNA結合ドメインを削除し、ハムスター検体由来のp53 RT-PCR産物とともにレポーター用酵母yIG397に導入し、酵母アッセイを行なった。［結果］本法によりDMBA誘発ハムスター頬嚢粘膜癌６例中２例に高率の赤コロニー(65%, 43%)を検出し、それぞれにクローナルな変異を同定した(R252L, 264-272 deletion)。以上より、キメラ蛋白の発現ベクターによる酵母アッセイでもp53の変異が検出可能であることが示され、ハムスターのp53変異の解析に有用な方法が開発された。