ポスターセッション

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ヒト大腸癌培養細胞株におけるアデノウイルスベクターによるｐ53遺伝子導入：土井理恵子,倉立至,岡本英司,笠城典子,安達博信,井藤久雄（鳥取大・医・一病理）

Adenovirus-mediated p53 gene transfer into colon carcinoma cell lines : Rieko DOI, Itaru KURATATE, EijiOKAMOTO, Noriko KASAGI, Hironobu ADACHI, HisaoITO(First Dept.Pathol.,Facul.of Med., Tottori Univ.)

【目的】アデノウイルスベクターを用いてP53遺伝子を大腸癌培養細胞株に導入し，アポトーシス誘導効果とアポトーシス関連蛋白発現を検討した．【材料と方法】ヒト大腸癌細胞株6株（COLO201,COLO320,DLD-1,SW837,WiDr,LoVo)に大腸菌LacZ遺伝子発現アデノウイルスベクター（AxCA-LacZ）を導入，72h後にX-Gal染色を行い各細胞株における遺伝子導入効率を検討した．ついで，ヒト野生型ｐ53遺伝子発現アデノウイルスベクター（AxCA-p53）を用い，ｐ53を導入した．Hoechst染色によりアポトーシス細胞を形態学的に観察し，Apoptotic Index （AI : %）を算出した．加えて，アポトーシス関連蛋白をWestern blot 法を用いて検出した．【結果】X-Gal染色では，50MOIにおいて80％以上のAd-LacZ導入がすべての培養細胞株で確認された．DLD1, LoVoでは経時的にAIが増加したが，COLO320, COLO201, SW837, WiDrでは変化はみられず，細胞はcell arrestを示した．Ad-p53導入後Western blot 法により，P53蛋白の経時的亢進，またP21の誘導が全細胞株でみられた．【まとめ】Ad-p53導入により大腸癌培養細胞株において，P53蛋白が高発現し，培養細胞はアポトーシスもしくはcell arrestを示した．